北虫草母种的扩大培养如何操作？

由于母种数量一般较少，不能满足栽培需要。必须对其转管扩大。扩繁用的培养基可同综合马铃薯、葡萄糖琼脂（简称综合PDA培养基）。也可用以下配方培养基。比较简单的如：蔗糖10克、蛋白胨10克，硫酸镁0.5克，维生素B5片，琼脂15克，水1000毫升。或者用蔗糖30克，天门冬酰胺1克，硫酸铁0.3克，磷酸二氢钾1.25克，氯化钾0.5克，硫酸铁0.01克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。经高压灭菌后备用。

转管接种是培养真菌类药材的一个最基本的操作，需在无菌室或相对清洁的环境进行，有无菌室，可在接种前打开紫外光灯1小时，关闭后半小时可供使用。培养基及操作用具事先放入无菌室，母种可由接种者带入，进入接种室前先洗手，换上干净的，最好是经过灭菌的衣服、帽子，穿上无菌间专用鞋，进去后中途最好不要出来。无菌室的门不要再打开，全部工作完毕再开，避免外部杂菌进入。

接种用的接种针、镊子等可插入盛酒精的广口瓶中备用。工作人员用75%酒精棉球擦手及擦菌种试管外壁。点燃酒精灯，左手并排拿母种管及待接的斜面试管，斜面向上，便于观看，先用右手轻轻松动棉塞。再用右手拿接种针，在酒精灯上灼烧片刻，针尖要烧红，其他凡进入试管部分也都要烧一烧灭菌。然后用右手小指及小指与无名指间分别夹着两个棉塞，轻轻拨出，左手把两个试管口在火焰上烧一下。再把接种针在火焰上烧过，伸入待接种试管斜面上使它冷却，然后伸入原母种管内，勾出少许白色菌丝体（米粒大），放到待接种试管内，放在斜面的中心部位，以利其菌丝向周围生长延伸。然后将棉塞塞上。这样就完成了第一管的接种程序，接种动作要迅速，接第二管时接种针必须重新在火焰上烧过再用。接完后贴上标签，写上菌名，接种日期等，一般一支母种可转接20支以上甚至40支新斜面。可将其7～10支为一扎，用牛皮纸包好放入20～25℃进行培养，10～14天菌丝长满斜面，即成二级母种。可将它作为纯菌种保存。更可以用它来生产栽培种。