为什么在原代肝细胞的培养基中加入地塞米松?
随着血清细胞培养的发展,培养基的质量是关键,而培养基的主要成分动物血清对细胞的生长和繁殖起着重要的甚至是不可替代的作用。动物血清中应用最广泛的是牛血清,因此血清是医药生物技术产品的重要原料之一。保证血清的质量也是提高生物制品质量的重要环节。血清类型。36860 . 68686868686
目前用于组织培养的血清主要是牛血清,一些特殊细胞也用人血清、马血清等进行培养。选择牛血清进行细胞培养的原因是:来源充足,制备技术成熟,经过长时间的应用试验,人们对其有了更深入的了解。牛血清适用于大多数哺乳动物细胞,但不排除在培养某些细胞时使用其他动物血清更合适。
牛血清是细胞培养中使用最多的天然培养基,含有丰富的细胞生长所必需的营养物质,具有极其重要的功能。牛血清可分为小牛血清、新生牛血清和胎牛血清。胎牛血清应通过剖腹产从胎牛中取出。新生牛血清取自出生后24小时内的新生牛;小牛血清取自出生于10-30天的小牛。显然,胎牛血清的质量是最高的,因为胎牛没有接触过外界,血清中含有的抗体、补体等对细胞有害的成分是最少的。2.血清的主要成分。
血清是通过从血浆中去除纤维蛋白而形成的复杂混合物。虽然其成分大部分已知,但仍有部分未知,血清的成分和含量往往随献血者的性别、年龄、生理状况和营养状况而变化。血清中含有各种血浆蛋白、肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等。这些物质在促进细胞生长或抑制生长活性方面具有生理平衡。虽然对血清的组成和功能的研究取得了很大进展,但仍存在一些问题,主要表现在:一是血清中可能有上百种成分,但其确切的组成、含量和作用机制尚不清楚,特别是对一些多肽生长因子、激素和脂质。这给研究工作带来了许多困难。第二,血清是批量生产的,批次之间差异很大,血清的保存期最多一年。因此,保证每批血清的相似性极其困难,限制了实验的规范性和连续性。第三,不排除血清中含有挥发性物质,这被认为是“瓶内变质”的原因之一。3.血清的主要作用。
提供基础营养素:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等。,这是细胞生长所必需的。
提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子,如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
提供结合蛋白:结合蛋白携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪和激素,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢中起重要作用。
提供接触促进和拉伸因子,以防止细胞粘附受到机械损伤。
对培养中的细胞有一定的保护作用:有些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞等,能释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起中和作用。这种效应是偶然发现的,现在有目的地用血清来SeO3消化胰蛋白酶,因为胰蛋白酶已广泛用于贴壁细胞的消化和传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,尤其是在悬浮培养中搅拌时。
硒等。4.细胞培养中使用血清的缺点
血清的成分很复杂。虽然含有许多对细胞有益的成分,但也含有对细胞有害的成分,这使得血清有几个明显的缺点:
对于大多数细胞来说,在体内,血清不是它们接触的生理液体,而是损伤在愈合。