如何配置1%琼脂糖凝胶
1.1%琼脂糖凝胶的制备(大胶70ml,小胶50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖于锥形瓶中,加入70ml(50m l)1×tae,将瓶口倒置,微波炉加热煮沸3次,直至琼脂糖完全熔化。
2.胶片准备:将电泳槽中的有机玻璃内槽(制胶槽)清洗干净,晾干,放入制胶玻璃板中。拿透明胶带把玻璃板和内胆两端的边缘封起来,形成一个模具。将内槽置于水平位置,并将梳子置于固定位置。将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶溶液混合,小心地倒入内罐中的玻璃板中,使胶液慢慢铺开,直至在整个玻璃板表面形成均匀的粘合层。
3.室温静置至凝胶完全固化,轻轻垂直拉动梳子,取下胶带,将凝胶和内槽放入电泳槽中。加入1×TAE电泳缓冲液,直至不通过橡胶板。
扩展数据:
储存温度:常温
商品名很多,比如Sepharose(瑞典,pharmacia),Bio-Gel-A(美国Bio-Rad)等等。琼脂糖凝胶依靠糖链之间的次级链,如氢键,来维持网络结构,网络结构的密度取决于琼脂糖的浓度。一般来说,它的结构是稳定的,并且它可以在许多条件下使用(例如水、pH4-9范围内的盐溶液)。
琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,不能用高压灭菌,可以用化学灭菌法处理。
琼脂糖,缩写为Ag,是琼脂中不带电荷的中性成分,也译为琼脂或琼脂糖。琼脂糖的化学结构由β-D-吡喃半乳糖(1-4)和3,6-脱水的α-L-吡喃半乳糖单元连接而成。
将琼脂糖,即主要成分为多糖的琼脂,几乎不含硫酸根,溶于热水中,冷却制成凝胶。制备的小颗粒用于凝胶过滤。适用于葡聚糖凝胶不能分级分离的大分子、细胞颗粒、病毒等的凝胶过滤。如果使用浓度低于5%的凝胶,也可以分馏。
由于其低吸附性,它有时被用来代替琼脂作为免疫电泳或凝胶内沉淀反应的支持物。
参考资料:
百度百科-琼脂糖凝胶