有人知道什么是酵母双杂交吗？

酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的。研究活细胞中的蛋白质相互作用，也可以通过报告基因的表达产物灵敏地检测对蛋白质的微弱和瞬时作用。研究蛋白质之间的关系是一项高度敏感的技术。

原则:

酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因的转录需要反式转录激活因子的参与。反式转录激活因子，如酵母转录因子GAL4，在结构上是模块化的，并且通常由两个或多个结构上可分离且功能上彼此独立的结构域组成，包括DNA结合结构域(DNA-BD)和转录激活结构域(DNA-AD)。当两个结合域分开后，它们仍有功能，但不能激活转录。只有当两个分离的结构域在空间上相互靠近时，才能再现完整的GAL4转录因子活性，并能激活上游激活序列的下游启动子(UAS)，从而转录该启动子的下游基因。

根据这一特性，将编码DNA-BD的基因和已知的蛋白诱饵蛋白的基因构建在同一表达载体中，并在酵母中表达了它们的融合蛋白BD-诱饵蛋白。在AD文库表达载体上构建编码AD的基因和cDNA文库。同时将上述两种载体转化到转化酵母中，转化酵母细胞的基因组既不能产生GAL4，也不能合成LEU、TRP、HIS和ADE，因此酵母不能在缺乏这些营养物质的培养基上正常生长。当上述两种载体表达的融合蛋白可以相互作用时，功能重建的反式作用因子可以激活酵母基因组中的报告基因HIS、ADE、LACZ和MEL1，从而通过功能互补和显色反应筛选出阳性菌落。提取并分离阳性酵母菌株中的AD文库载体，以便对插入载体中的文库基因进行测序和分析。