为什么选择血清蛋白区带电泳检测M蛋白？

一、M蛋白的基础知识

m蛋白是浆细胞或B淋巴细胞大量增殖时产生的异常免疫球蛋白。它的氨基酸组成和排列顺序非常均匀，空间构象和电泳特征也完全一样。本质上是免疫球蛋白或其片段(轻链、重链等。).因为它是由单克隆产生的，所以经常出现在多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症和恶性淋巴瘤患者的血液或尿液中，所以被称为M蛋白。这些M蛋白大多没有抗体活性，所以也叫副蛋白。

m-白蛋白血症可分为恶性和不明两类。恶性M蛋白血症多见于多发性骨髓瘤(包括轻链病)、巨球蛋白血症、重链病、7SIg M病(Solomen -Konkel病)、半分子病和不完全骨髓瘤蛋白病(C端基因缺陷)。意义未明的单克隆丙种球蛋白病(M GUS)可分为两种，一种是伴有其他恶性肿瘤(如恶性淋巴瘤)，另一种称为良性M G US。

M蛋白的检测方法主要有琼脂或琼脂糖电泳、免疫电泳、免疫固定电泳和选择性免疫电泳。

二、M蛋白的鉴定

1.多发性骨髓瘤和巨球蛋白血症患者M蛋白的检测和鉴定

(1)血清总蛋白定量分析。90%患者血清总蛋白含量升高(70%患者> 100 g/L)，约10%患者正常甚至偏低(如轻链病)。

(2)血清蛋白醋酸纤维膜或琼脂糖电泳。M蛋白在电泳上有典型的单株峰(也叫M带)，特点是窄而粗的带，扫描时峰尖。γ区高宽比≥2，β区高宽比≥1。由于Ig的不同，这个M带可以出现在γ ~ α 2的任何区域。M蛋白增殖的另一个特点是其他区。

条带明显减少，显示的图像更简单。有时候有些患者的血M蛋白不高，这是突变细胞的Ig分泌能力决定的。这种患者血清的M峰在电泳时不明显，容易被其他蛋白覆盖，需要稀释血清，用免疫固定电泳等其他敏感方法检测。

(3)血清免疫球蛋白定量。一般属于M蛋白的Ig含量显著升高，其他Ig正常或显著降低。

(4)免疫电泳。

①正常人血清免疫电泳结果:可区分20多种蛋白质成分。阳极端有一条船形粗沉淀线，为白蛋白。通常Ig成分在阴极端附近，离加样孔最近的是Ig M，其次是IgA和IgG，形成平滑连续的沉淀线。

②多发性骨髓瘤:多发性骨髓瘤可分为IgG、IgA、Ig M、IgI)和IgE5五种类型。IgG和IgA进一步分为亚类，所有Ig轻链进一步分为两种。因此，免疫电泳中变形沉淀线的位置随每个分子的电泳带而异，可从慢γ ~ β 2区出现。IgG 1多出现在慢γ区，IgG 4在β ~ α区。

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面积。m蛋白与相应的抗重链血清和抗轻链血清形成致密的沉淀弧，迁移范围非常有限。由于该患者血清中Ig含量较高，在免疫扩散过程中可能存在抗原绝对过量而无沉淀线。这时候就需要稀释血清重做，往往可以得到满意的效果。③巨球蛋白血症:由于IgM分子的增殖。在免疫电泳中，常出现以下特征:一是沉淀线明显变形。一般情况下，IgM形成短的沉淀线，不容易看到变形。当IgM大量出现时，整个IgM沉淀线会变形。第二，抗原孔周围和沿电泳纵轴有块状沉淀。第三，电泳过程中不存在Ig M成分的迁移，这多是由于IgM分子的聚合和电泳的不动造成的。

(5)尿蛋白的检测。

①定性检测:采用热沉淀法和磺基水杨酸法。

②免疫电泳:浓缩尿液后，进行免疫电泳。大多数多发性骨髓瘤和轻链疾病患者仅有一条密集、拱形和弯曲的沉淀线。60% ~ 80%的骨髓瘤患者和几乎所有轻链疾病患者均可通过该方法检出。

③轻链白蛋白-戊二醛交联免疫电泳:多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症、轻链病可为阳性，正常人为阴性。该方法对尿中柱鞘蛋白的检出率为100%，假阳性率为4%。当尿液含200 μ g/ml时，可出现阳性结果。

2.重链病M蛋白的检测与鉴定

像多发性骨髓瘤，免疫电泳中重链分子比Ig分子小，所以迁移性更快，电泳位置更靠近阳极侧(β ~ α)。但重链病一般需要通过免疫电泳来确诊。

3.7乙状结肠病中m蛋白的检测和鉴定

一般Ig M为五聚体，沉降系数为19S，而7S IgM患者的IgM为单体，沉降系数为7S。证明7S Ig M有两种方法:一种是在确定Ig M总量后，将1 ~ 2 ml血清过Sepharose 6B柱，然后根据洗脱峰图用面积仪测量7S Ig M占总Ig M的百分比，与Ig M总量换算，得到7S IgM的绝对值。另一种方法是植物血凝素的选择性电泳(PHA)。这种方法的原理是五聚体Ig M能与PHA结合形成沉淀，而单体IgM不与PHA结合。在琼脂凝胶中加入PHA并进行电泳后，五聚体Ig M被P H A截留，而7S Ig M继续向阳极游去，并能与后来加入抗体槽的Ig M抗血清反应形成单一沉淀弧。