如何辨别花粉的好坏
表7蜂花粉分级的质量指标
表7蜂花粉分级质量指数(续)-1
注:碎骨料指数指基层采集时的限值。
检验方法分为感官检验和理化检验。
(1)感官测试
用眼睛或放大镜观察,闻一闻,尝一尝,根据花粉的颜色、状态、气味和味道进行判断。
①杂质测定
购买时,目测无明显杂质。将手插入蜂花粉包装袋,手指向后弯曲,慢慢从袋中提出。手指上没有沙子和细土,说明比较纯净。或者准确称取约100g蜂花粉样品,放入搪瓷盘中,挑出杂质称重,用以下公式计算杂质:
杂质=杂质重量(克)/样品重量(克)×100%
②单个花粉团率的测定。
也称计数法,即从蜂花粉包装中随机取出几克蜂花粉,用手数100,挑出蜜源植物的蜂花粉颗粒,按以下公式计算:
单个花粉团率=该蜜源植物的蜂花粉团(粒)数/蜂花粉团(粒)总数×100%。
当根据颜色难以区分蜂花粉颗粒的品种时,可以用显微镜检验其区别。
③水分测定
也称为烘干。准确称取约10g蜂花粉样品,置于已干燥至恒重的培养皿或铝盘中,样品厚度约5mm。放入电吹风干燥箱中,105℃干燥2-4小时后取出,放入烘干机中,冷却至室温后称重。在相同温度下重复干燥约65438±0小时,直到重量恒定(两次重量之差小于2 mg)。根据以下公式计算:
水分=B-C/B-A×100%
其中A为培养皿的重量(克),B为样品和培养皿的重量(克),C为B达到恒重时的重量(克)。平行试验结果的允许误差为0.4%。
④颗粒破碎的测定。
称取约50克蜂花粉样品,用20目筛筛出破碎的颗粒和粉末,称重,用下列公式计算:
破碎颗粒=筛分后的破碎颗粒重量(g)/蜂花粉样品重量(g) ×100%
⑤蛋白质测定。
凯氏定氮法平行实验结果的允许误差为0.6%。
试剂:
浓硫酸(分析纯)
硫酸铜和硫酸钾混合试剂:称取含5个结晶水的硫酸铜3g和硫酸钾9g,放入研钵中,混合均匀,磨细。
田氏混合指示剂:吸取50毫升0.1%亚甲蓝乙醇溶液和200毫升0.1%甲基红乙醇溶液,混合摇匀,贮存于棕色瓶中。
2%硼酸溶液:称取2g硼酸,加入约50 ~ 60ml蒸馏水溶解并稀释至100ml,摇匀,然后滴加田氏混合指示剂,摇匀至溶液呈紫色。
0.1 mol/L盐酸标准溶液:量取9 ml浓盐酸,加蒸馏水稀释至1000 ml,摇匀。
校准:准确称取0.15g在270 ~ 300℃干燥至恒重的标准无水碳酸钠,置于150ml锥形瓶中,加50ml蒸馏水溶解,滴加2滴田氏混合指示剂,用上述盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫色,按下式计算盐酸的摩尔浓度(m):
M=W/V×0.106
式中,V为盐酸溶液消耗的体积(ml);
W——无水碳酸钠的重量(g)。
将0.1 mol/L盐酸溶液用蒸馏水稀释10倍,得到0.01 mol/L盐酸标准溶液(使用前配制)。
40%氢氧化钠溶液。
仪器设备:1/10000天平、消化管、容量瓶、锥形瓶、移液管、25ml滴定管、量筒、一套凯氏半微量蒸馏装置、调温远红外消化电炉。
测定步骤:
消化:准确称取约50 ~ 60mg磨细混匀的蜂花粉样品,置于消化管中,加入300g硫酸钾和硫酸铜混合试剂和3ml浓硫酸,将消化管插入调温远红外消化器的孔中,接通电源,在通风柜中消化,待消化液清澈亮绿色时消化完成(消化时间约1小时)。
蒸馏:消化液冷却后,定量转入蒸馏器,用少量蒸馏水冲洗消化管数次,洗涤液并入蒸馏器。在蒸馏器中加入11 ~ 12 ml的40%氢氧化钠溶液后,加入5 ml蒸馏水(一半流入蒸馏器,另一半密封在玻璃中),用调温电炉开始蒸馏,用装有10 ml的2%硼酸溶液的锥形瓶吸收蒸馏释放的氮气,直至锥形瓶中溶液的颜色由紫红色变为红色。
滴定:用0.01 mol/L盐酸标准溶液滴定锥形瓶中吸收的氨量,直至溶液由绿色变为紫红色,按下式计算:
蛋白质(%)=(va-VB)×m×0.014×6.25/w×100。
式中,VA——滴定样品消耗的盐酸标准溶液的毫升数;VB——滴定空白消耗的盐酸标准溶液的毫升数;
M——盐酸标准溶液的摩尔浓度;
W——称取样品的克数;
0.014-1毫克氮;
6.25——氮转化为蛋白质的系数。
⑥维生素C的测定:
用2,6-二氯苯酚靛酚钠盐滴定法,平行试验结果的允许误差为0.3 mg /100 g。
试剂:
2%草酸溶液。
标准维生素C溶液:准确称取约20 mg维生素C(分析纯),置于100 ml容量瓶中,用2%草酸溶液稀释至刻度,摇匀(使用前配制)。
2,6-二氯酚靛酚钠溶液:称取约50毫克2,6-二氯酚靛酚钠(分析纯),溶于50毫升热蒸馏水中,冷却,定量转移至250毫升容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,置棕色瓶中,冷藏。
校准:准确吸取标准维生素C溶液2ml,加入2%草酸溶液5ml,用2,6-二氯苯酚靛酚钠溶液滴定至粉红色,终点为15s不褪色。根据已知的标准维生素C溶液和2,6-二氯酚靛酚钠溶液的用量,按下式计算1毫升2,6-二氯酚靛酚。
W=A×2/V
其中W-1毫升2,6-二氯苯酚靛酚钠溶液相当于毫克维生素C;
a——1毫升维生素C标准溶液中维生素C的毫克数;
V——滴定2毫升维生素C标准溶液所消耗的2,6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数。
15%亚铁氰化钾溶液。
30%醋酸锌溶液。
仪器:一套真空过滤装置、托盘扭秤和普通玻璃器皿。
测定步骤:
样品制备:准确称取约10g蜂花粉样品,置于研钵中,加入少许2%草酸溶液研磨,定量转移至100ml容量瓶中,将2%草酸溶液稀释至刻度,加入几毫升15%亚铁氰化钾溶液,再加入几毫升30%醋酸锌溶液(直至溶液不沉淀)。
滴定:准确吸取10 ml样品溶液,置于锥形瓶中,用2,6-二氯苯酚靛酚钠溶液滴定至呈粉红色,终点为15秒不褪色。记下2,6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数,按下式计算:
w =(V-V 1)×N/b×b/a×100
其中w-100g蜂花粉样品含维生素C毫克;
V1——滴定空白消耗的2,6-二氯苯酚靛酚钠溶液的毫升数;
N-1毫升2,6-二氯苯酚靛酚钠溶液相当于毫克维生素C;
B——滴定所取样品溶液的毫升数;
A——样品的克数;
B——样品溶液的总毫升数。
⑦灰分测定:
仪器:1/10000分析天平、高温炉、坩埚。
测定步骤:准确称取约10g蜂花粉样品,放入恒重坩埚中,在105℃烘箱中干燥至近恒重,300℃灼烧至完全碳化,移入高温炉中,600℃灼烧至完全灰化,冷却至200℃以下,放入干燥器中,冷却至室温,准确称取至。使用以下公式计算结果:
灰分(%)=W2-W3/W1-W3×100
其中w 1-坩埚和样品的重量(g);
w2-坩埚和灰分的重量(g);
W3——烧至恒重的坩埚重量(g)。
平行试验的允许误差为0.3%。
⑧过氧化氢酶测定-气体法;
仪器:徐-胡型气体容积法蜂花粉活性检测仪。
试剂:
3%过氧化氢溶液:将30%过氧化氢溶液稀释10倍。
测定步骤:
将清水倒入水浴至产气管架,打开电源,调节温控器至指示灯亮度最大。当水温升至38℃时,调节温控器关闭指示灯,待水温保持在37℃5分钟后再使用。
准确称取约0.5g蜂花粉样品,置于小烧杯中,加入65438±0ml蒸馏水,用圆形玻璃棒将蜂花粉团研磨成均匀的蜂花粉水悬浮液。
用带三通阀的5 ml产气管吸尽蜂花粉水悬液,除去空气,关闭阀门,置于37℃水浴中10分钟(简称A管)。
用另一根产气管吸取5ml的3%过氧化氢溶液,排除空气,关闭阀门,置于37℃水浴中10分钟(简称B管)。
10分钟后,将A管和B管从水浴中取出,打开B管阀门排除空气,连接A管和B管之间的接口,然后从B管向A管注入1 ml过氧化氢溶液,关闭阀门,将A管放入37℃的水浴中,同时记录2分钟后的产气量(ml)
过氧化氢酶单位= 1268× V。
式中1268——37℃时1毫升氧气的重量(微克);
v——37℃时1g蜂花粉1min产生的氧气体积(ml)。
平行试验结果的允许误差为50个过氧化氢酶单位。