离子交换色谱中为什么要用氯离子洗脱阴离子?

离子交换色谱中为什么要用氯离子洗脱阴离子?

阴离子交换柱的填料是带正电荷的填料,在低盐条件下通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和带负电荷的物质(如DNA)。这些带负电的物质由于电荷和分子大小不同,与带正电的填料的结合力也不同。梯度氯离子(一般是氯化钠梯度,例如当氯化钠线性梯度从100mM增加到1M),氯离子会与结合物质竞争结合带正电荷的填料。随着氯离子浓度的增加,氯离子的竞争会越来越强,与填料结合的物质会由弱到强洗脱,以形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分离。

阳离子交换柱正好相反,柱填料带负电,结合的带正电的物质用钠离子洗脱。